LOS OBJETIVOS DE ESTE ESTUDIO HAN SIDO LA LOCALIZACION DELOS CENTROS FUNCIONALES EN CITOCROMO P-450 Y EN LANADPH-CITOCROMO P-450 REDUCTASA, ASI COMO LA ELABORACIONDE UN MODELO PARA LA LOCALIZACION DE AMBAS PROTEINAS ENLA MEMBRANA MICROSOMAL QUE TENGA EN CUENTA LAS EXIGENCIASFUNCIONALES DEL SISTEMA. SE HAN PURIFICADONADPH-CITOCROMO P-450 REDUCTASA Y CITOCROMO P-450 APARTIR DE MICROSOMAS DE HIGADOS DE RATAS INDUCIDAS CONFENOBARBITAL. LA LOCALIZACION DE CENTROS FUNCIONALES ENAMBAS PROTEINAS SE HA ABORDADO MEDIANTE TRANSFERENCIA DEENERGIA DE FLUORESCENCIA Y RECONSTITUCION EN VESICULASLIPIDICAS DE COMPOSICION CONOCIDA. LOS RESULTADOSOBTENIDOS MUESTRAN QUE LOS GRUPOS FAD Y FMN DE LANADPH-CITOCROMO P-450 REDUCTASA SE ENCUENTRANRELATIVAMENTE ALEJADOS DE LA INTERFASE LIPIDO-AGUA, Y QUEAMBOS GRUPOS SE HALLAN EMBEBIDOS EN LA ESTRUCTURAPROTEICA, SIENDO LA DISTANCIA ESTIMADA ENTRE AMBOS GRUPOSDE 20 A. SE APORTAN EVIDENCIAS EXPERIMENTALES DIRECTASQUE MUESTRAN QUE FAD ES MENOS ACCESIBLE AL MEDIO ACUOSOQUE FMN Y QUE CONTRIBUYE CON APROXIMADAMENTE EL 84+-3% ALA FLUORESCENCIA TOTAL DE FLAVINAS EN LA NADPH-CITOCROMOP-450 REDUCTASA NATIVA, ADEMAS DE LA PRESENCIA DE UNDOMINIO DE UNION DE ESTEROIDES EN CITOCROMO P-450. LADISTANCIA ESTIMADA ENTRE EL GRUPO HEMO DE CITOCROMO P-450Y LAS CABEZAS POLARES DE LOS LIPIDOS EN SISTEMASRECONSTITUIDOS ES DE 48-50 A, SIENDO LA DISTANCIA DELGRUPO HEMO AL SITIO DE UNION DEL SUSTRATO MENOR DE 53 A.POR ULTIMO, SE PROPONE UN MODELO PARA LA LOCALIZACION DELOS CENTROS FUNCIONALES DE AMBAS PROTEINAS EN LA MEMBRANAMICROSOMAL.
