TESIS
OBTENCIÓN DE SONDAS DE ADN PARA LA DETECCIÓN DE PENICILLIUM POLONICUM PRODUCTOR DE VERRUCOSIDINA EN INDUSTRIAS CÁRNICAS
1999-07-09
Higiene Y Tecnología De Los Alimentos
Agentes Patogenos De Los Alimentos; Ciencias De La Nutricion; Ciencias De La Vida; Ciencias Medicas; Ciencias Tecnologicas; Higiene De Los Alimentos; Microbiologia; Mohos; Tecnologia De Los Alimentos
DIRECTORES

Juan Jose Cordoba Ramos (Director)

Juan José Córdoba Ramos

María Mar Rodríguez Jovita

Rodríguez Jovita M. Mar (Codirector)
TRIBUNAL

Fregapane Quadri, Giuseppe (Vocal)

Garrido Fernández, María Dolores (Vocal)

Martín De Santos, María Del Rosario (Presidente)

Núñez Breña, Félix (Secretario)

Padilla Peñas José Angel (Vocal)
DESCRIPCIÓN
Durante la elaboración de productos cárnicos curados de larga maduración,como el jamón curado, se desarrolla una población microbiana compuestafundamentalmente por mohos entre los que pueden encontrarse especies toxigénicas.Para el control de estos mohos toxigénicos, es necesario disponer de métodosrápidos y sensibles de detección, entre los que se encuentran la hibridacióncon sondas de ADN. Para la elaboración de este tipo de sondas se puedenutilizar diferentes estrategias en función de si es conocida o no la secuenciade los genes que pueden estar relacionados con la síntesis de la micotoxina.En el caso de las micotoxinas, dado que para la mayoría de ellas se desconocela ruta metabólica de su síntesis, una posible estrategia a abordar esla elaboración de una biblioteca de ADN genómico, seleccionando los clonesobtenidos mediante la hibridación con sondas elaboradas en condicionesde producción y de no producción de la micotoxina, y la elaboración y laposterior selección y comprobación de la sonda seleccionada con P. Polonicumproductor de verrucosidina.En el presente trabajo se optimó esta metodología para cada una de lasetapas y se consiguió elaborar una biblioteca de ADN con 5000 clones, seleccionando120 clones como posibles portadores de ADN relacionado con la síntesisde verrucosidina. A partir de estos clones se obtubieron sondas que fueronposteriormente seleccionadas con ARNm obtenido en diferentes condicionesde producción de verrucosidina. Una de las sondas probadas (denominadaSVr1)mostró una alta sensibilidad y especificidad en la detección de P.Polonicum productor de verrucosidina. La metodología ensayada permite ladetección sensible y específica de P. Polonicum en aproximadamante 24 hy debería ser considerada para la elaboración de sondas en mohos productoresde otras micotoxinas.