TESIS
VALIDACIÓN DE TÉCNICAS PARA EL DESARROLLO DE UN SISTEMA MULTIDIAGNÓSTICO DE LA LEISHMANIOSIS VISCERAL POR LEISHMANIA INFANTUM
2021-07-19
Programa De Doctorado En Salud Pública Y Animal Por La Universidad De Extremadura
Parasitologia Animal; Parasitologia Molecular; Patologia Clinica; Salud Publica
DIRECTORES

Juan Carlos Parejo Rosas (Director)

Luis Carlos Gómez Nieto (Codirector)

Virginia Iniesta Orozco (Codirector)
TRIBUNAL

Martínez Cruz, María Setefilla (Vocal)

Reina Esojo, David (Presidente)

Viñuelas Bayón, Jesús (Secretario)
DESCRIPCIÓN
Introducción: El diagnóstico de la leishmaniosis canina (L. Can) por Leishmania infamtum, es complejo por el largo periodo de incubación, la existencia de portadores inaparentes capaces de trasmitir el parásito a los vectores y por la necesidad de utilizar diferentes técnicas diagnósticas, inmunológicas y moleculares, para la detección precoz. Objetivos: Los objetivos generales planteados fueron: a) Validar las técnicas aplicadas al diagnóstico de la LCan, ELISA SLA IgG2, IFI y Real Time PCR (qPCR); b) desarrollar un sistema de diagnóstico múltiple para la detección y seguimiento de perros infectados por L. infantum.Material y métodos: Para la validación de ELISA SLA IgG2 e IFI, se utilizaron muestras de suero sanguíneo procedentes de 116, y 96 perros respectivamente y para qPCR, 44 muestras de médula ósea y ganglio linfático. Se estudiaron los atributos linealidad, exactitud, especificidad, sensibilidad, precisión, límite de detección y cuantificación, robustez y estabilidad.Para la consecución del segundo objetivo, se ha desarrollado un sistema de diagnóstico múltiple utilizando muestras no invasivas, pelo, hisopados (cerumen-mucosas-piel) y sangre seca adherida a papel Whatman, cuyo dosier se incluye en esta Tesis Doctoral y cuyos resultados de aplicación, se discuten mediante dos artículos publicados. Resultados y conclusiones: Se evidencia que nuestros métodos diagnósticos estandarizados, ELISA, IFI y qPCR, son altamente fiables, sensibles y específicos. Estas técnicas han servido de referencia para el desarrollado MultiLeish 5D, un sistema de diagnóstico múltiple para la detección y seguimiento de la LCan, que permite a los profesionales veterinarios el diagnóstico en las diferentes fases y estados de la patocronia, primoinfectados, latentes evolutivos y patentes.